正确鉴定ABO血型是输血前最重要的一项检测，血型鉴定错误会导致严重的溶血性输血反应甚至是死亡。目前血型鉴定最常用的方法是卡式微柱法，此法具有诸多优点，但由于血型抗原抗体反应的复杂性及各种因素的影响，往往会出现正反定型不符，不能鉴定血型的情况。常见的原因有如下几点：

1.血浆中抗体减弱或缺失：白血病、肿瘤、免疫球蛋白水平降低等患者抗体减弱，老年人抗体水平生理性下降，婴幼儿尚未产生抗体或抗体效价低，均影响反定型的鉴定。可通过加大患者血浆用量(2倍或4倍)的方法进行鉴定。

2.红细胞抗原减弱：最常见的是白血病、恶性肿瘤等，抗原减弱或消失，干扰正定型，凝集减弱或消失，可加大患者红细胞浓度或进行吸收放散实验以确定抗原 。

3.不规则抗体：这一类抗体存在于患者血清中，可在反定型中与标准红细胞上的相应抗原发生凝集（而与A或B抗原无关），导致正反不一致。抗体筛选试验阳性，应用谱细胞可鉴定出不规则抗体种类。

4.自身免疫性溶血性贫血：患者红细胞表面存在致敏自身抗体，DAT（直接抗人球蛋白试验）阳性，有时正定型会发生非特异性凝集。同时血清中存在的自身抗体也能干扰反定型。可用37℃生理盐水洗涤患者红细胞，一般可排除干扰。

5.冷凝集素：高效价冷凝集素在体外4℃或室温条件下可与自身红细胞发生非特异性凝集反应，可出现正反定型全凝集的现象。用37℃生理盐水洗涤红细胞，去除红细胞表面附着的冷凝集素，可获得可靠地正定型结果。37℃温浴患者标本，可消除血浆中游离的冷凝集素对反定型的影响。

6.亚型：由遗传因素导致，即红细胞A或B抗原弱化，正定型抗A或抗B有时不能检测出抗原而不出现凝集，造成定型困难。进一步鉴定需正定型增加抗-H、抗-A1、抗-AB，反定型增加O细胞、A1细胞、A2细胞，还应进行吸收放散试验、唾液中血型物质检测等。

7.血浆成分异常：多发性骨髓瘤患者易使红细胞发生缗钱状凝集，在血清中加入1—3滴生理盐水凝集可消失（真凝集不受影响）。某些药物主要为血浆扩容剂如右旋糖酐、聚维酮、羟乙基淀粉等,易使红细胞发生缗钱状凝集。

8.造血干细胞移植：血液病患者进行ABO血型不同的异基因外周血干细胞移植后，受者原有血型的红细胞不断衰亡，最终被供者血型的红细胞取代之，患者原有的同种凝集素在移植后逐渐消失，供者的干细胞在受者体内存活时，患者红细胞上的血型变为与供者的血型一致，但血清中并没有产生对应的抗体，会造成正反定型不一致。

疑难血型只是一种血型难以判定的现象，而非一种型别，当遇到难以鉴定的血型时，一定要首先核对各种信息及实验操作无误，然后了解病史：年龄、妊娠史、输血史、临床诊断等，设计针对性的试验。